革蘭染色步驟正確順序 革蘭染色是什么順序
2020-10-14 天奇生活 【 字體:大 中 小 】
革蘭染色正確順序:1、涂片固定;2、草酸銨結(jié)晶紫染1分鐘;3、蒸餾水沖洗;4、加碘液覆蓋涂面,染約1分鐘;5、水洗,用吸水紙吸去水分;6、加95%酒精數(shù)滴,并輕輕搖動(dòng)進(jìn)行脫色,20秒后水洗,吸去水分;7、蕃紅染色液(稀)染1分鐘后,蒸餾水沖洗;8、干燥,鏡檢。
革蘭染色步驟正確順序
革蘭氏染色是用來(lái)鑒別細(xì)菌的一種方法:這種染色法利用細(xì)菌細(xì)胞壁上的生物化學(xué)性質(zhì)不同,可將細(xì)菌分成兩類,即革蘭氏陽(yáng)性與革蘭氏陰性。這一染色方法由丹麥醫(yī)生漢斯·克里斯蒂安·革蘭于1884年所發(fā)明,最初是用來(lái)鑒別肺炎球菌與克雷白氏肺炎菌之間的關(guān)系。
原理:通過(guò)結(jié)晶紫初染和碘液媒染后,在細(xì)胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物,革蘭氏陽(yáng)性菌由于其細(xì)胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密,故遇乙醇或丙酮脫色處理時(shí),因失水反而使網(wǎng)孔縮小,再加上它不含類脂,故乙醇處理不會(huì)出現(xiàn)縫隙,因此能把結(jié)晶紫與碘復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi),使其仍呈紫色。
而革蘭氏陰性菌因其細(xì)胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差,在遇脫色劑后,以類脂為主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié)晶紫與碘復(fù)合物的溶出,因此通過(guò)乙醇脫色后仍呈無(wú)色,再經(jīng)沙黃等紅色染料復(fù)染,就使革蘭氏陰性菌呈紅色。
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